Ključna razlika - Gram Stain vs Culture
Barvanje po Gramu je tehnika barvanja, ki se izvaja za diferenciacijo bakterij v dve skupini glede na debelino plasti peptidoglikana v njihovi celični steni. Kultura je metoda gojenja in vzdrževanja mikroorganizmov v laboratorijskih pogojih za različne analize. Ključna razlika med madežem v gramih in gojiščem je njihova funkcija; gram seva tehnika obarvanja bakterij, kjer je kultura način gojenja in vzdrževanja mikroorganizmov.
VSEBINA
1. Pregled in ključna razlika
2. Kaj je madež po Gramu
3. Kaj je kultura
4. Vzporedna primerjava - Gramov madež v primerjavi s kulturo
5. Povzetek
Kaj je Gram Stain?
Barvanje po Gramu je pomembna tehnika diferencialnega barvanja, ki se uporablja za identifikacijo bakterij v mikrobiologiji. To tehniko je uvedel danski bakteriolog Hans Christian Gram leta 1884. Obarvanje po Gramu razvršča bakterije v dve glavni skupini: gram pozitivne in gram negativne; ti so zelo pomembni pri razvrščanju in identifikaciji bakterij. Barvanje po Gramu se izvede kot začetni korak za karakterizacijo bakterij.
Bakterije so razvrščene glede na razlike v njihovi celični steni. Gram pozitivne bakterije vsebujejo v svoji celični steni debelo plast peptidoglikana, medtem ko gram negativne bakterije v svoji celični steni vsebujejo tanko plast peptidoglikana, kot je prikazano na sliki 01. Rezultat obarvanja po gramih bo temeljil na razliki v debelini peptidoglikanske plasti celične stene.
Slika 1: Gram pozitivne bakterije in gram negativne bakterije
Obarvanje Gramsa izvedemo s štirimi različnimi reagenti in sicer; primarni madež, mordant, sredstvo za razbarvanje in nasprotni madež. Kristalna vijolica in safranin sta primarna in nasprotna madeža, grami joda in 95-odstotni alkohol pa kot žila in razbarvalec.
Osnovni koraki po Gramih
- Na čistem steklenem stekelcu pripravimo bakterijski razmaz, ga segrejemo in ohladimo.
- Razmaz prelijemo s kristalno vijolično za 1-2 minuti.
- Razmaz splaknite s počasi tekočo vodo iz pipe, da odstranite odvečne madeže.
- Na razmaz za 1 minuto nanesemo gramov jod.
- Razmaz splaknemo s počasi tekočo vodo iz pipe
- Razmaz speremo z 95% alkoholom 2–5 sekund in speremo s počasi tekočo vodo iz pipe.
- Razmaz 1 minuto obarvamo s safraninom
- Razmaz splaknemo s počasi tekočo vodo iz pipe, posušimo in opazujemo pod mikroskopom.
Na koncu gramovega madeža bomo gram negativne bakterije opazili v rožnati barvi, medtem ko bomo gram pozitivne bakterije opazili v vijolični barvi, kot je prikazano na sliki 02. O izidu gramovega madeža odloča debelina plasti peptidoglikana v njihovo celično steno. Med razbarvanjem se primarno madež in žila zlahka odstranijo iz gram negativnih bakterij in postanejo brezbarvni, saj imajo tanko plast peptidoglikana. Primarni madež se zadrži v gram pozitivnih bakterijah, saj imajo debelo plast peptidoglikana. Nasprotno madež zaradi zadrževanja primarnega madeža ne bo učinkovit za gram pozitivne bakterije. Tako bodo gram pozitivne bakterije vidne v primarni barvi madežev, tj. Vijolični. Proti madež bo obarval gram negativne bakterije in bo viden v izbirni barvi, ki je safraninska barva. Zato je bakterije po Gramu enostavno razvrstiti v dve skupini in je koristno pri diferenciaciji in identifikaciji bakterij.
Slika 2: Gramov sev
Kaj je kultura?
Kultura mikrobov je metoda gojenja in vzdrževanja mikroorganizmov v laboratorijskih pogojih za različne namene. Kulture gojimo v trdnih, poltrdnih in tekočih medijih glede na vrsto in namen gojenja mikroorganizmov. Kulture so opremljene s potrebnimi hranili in rastnimi pogoji, ki jih zahtevajo mikroorganizmi. Obstajajo različne sestavine gojišča, kot so vir energije, vir ogljika, vir dušika, minerali, mikrohranila, voda, sredstvo za strjevanje itd. Optimalno temperaturo, kisik in pH je treba prilagoditi glede na vrsto gojenega mikroorganizma.
Obstajajo različne vrste mikrobnih kultur; na primer, šaržna kultura, kontinuirana kultura, kultura vboda, kultura agarnih plošč, gojitvena kultura itd. Glede na sestavo gojišča obstajajo različne vrste gojišč, znane kot sintetična gojišča, polsintetična gojišča in naravni mediji. Mikrobne kulture pripravljamo v sterilnih pogojih v posebni komori, imenovani laminarni zračni tok. Gojišče in steklovina se sterilizirata pred inokulacijo želenega mikroorganizma. V ustreznih sterilnih pogojih ciljni mikroorganizem prenesemo v steriliziran hranilni medij in inkubiramo pri optimalni temperaturi. Znotraj medija se bo mikroorganizem razvijal in razmnoževal z uporabo zagotovljenih hranil.
Slika 3: Bakterijska kultura na plošči
Kakšna je razlika med madežem po Gramu in kulturo?
Diff Article Sredina pred mizo
Gram Stain vs Culture |
|
| Gramsov sev je tehnika diferencialnega obarvanja, ki se uporablja za diferenciacijo in identifikacijo bakterij. | Kultura mikrobov je metoda gojenja mikroorganizmov v laboratoriju. |
| Komponente | |
| Pri tem se uporabljajo različni reagenti, vključno z dvema madežema. | Pri tem se uporabljajo različna gojišča, kot so trdna, poltrdna in tekoča gojišča, sestavljena iz hranil in drugih potrebnih pogojev. |
| Osnovne funkcije | |
| To omogoča razvrščanje bakterij v dve skupini: grami negativni in grami pozitivni. | To omogoča razmnoževanje mikroorganizmov za različne namene. |
| Osnova | |
| Izid obarvanosti po Gramu temelji na razlikah v plasti peptidoglikana celične stene. | Mikroorganizmi bodo rasli in se množili v gojiščih. |
| Izid | |
| Gram negativne bakterije so vidne v roza barvi, gram pozitivne bakterije pa v vijolični barvi. | Na ploščah so vidne kolonije mikroorganizmov. Na tekočih medijih so mikroorganizmi v suspendirani obliki. |
Povzetek - Gram Stain vs Culture
Mikrobne kulture pripravljamo in vzdržujemo v laboratorijskih pogojih za različne namene, kot so shranjevanje, testiranje, kemično čiščenje itd. Barvanje po Gramu je postopek barvanja, ki bakterije loči v dve glavni skupini, imenovani gram negativne bakterije in gram pozitivne bakterije. Zato je razlika med madežem v gramih in gojiščem v tem, da je madež v gramih tehnika obarvanja bakterij, medtem ko je kultura metoda gojenja in vzdrževanja mikroorganizmov v laboratorijih.
