Ključna razlika - Gram Stain vs Acid Fast
Bakterije so zelo majhni mikroorganizmi. So prosojni, njihovo odkrivanje pa je težko v življenjskih in nezahranjenih pogojih. Tako se za lažje odkrivanje bakterij razvijejo različne metode barvanja. Obstajajo tri glavne vrste tehnik barvanja: preprosto barvanje, diferencialno barvanje in strukturno barvanje. Diferencialno obarvanje je tehnika, pri kateri se za razlikovanje bakterij uporablja več kot en madež. Gramovi madeži in kislinsko hitri madeži so najbolj znani kot diferencialni madeži. Obarvanje po Gramu je diferencialna tehnika obarvanja, ki bakterije loči v dve skupini, znani kot gram pozitivne bakterije in gram negativne bakterije. Kislo odporen madež je diferencialni madež, ki se uporablja za prepoznavanje kislo obstojnih organizmov, kot je Mycobacterium, iz nekislinsko hitrih organizmov. To je ključna razlika med madeži po Gramu in Acid Fast.
VSEBINA
1. Pregled in ključna razlika
2. Kaj je barvanje po Gramu
3. Kaj je kislo hitro
4. Podobnosti med madežem po Gramu in hitro kislino
5. Primerjava ob strani - Gramovo barvanje v primerjavi s kislim v tabelarni obliki
6. Povzetek
Kaj je Gram Stain?
Barvanje po Gramu je pomembna tehnika diferencialnega barvanja, ki se uporablja za identifikacijo bakterij v mikrobiologiji. To tehniko je uvedel danski bakteriolog Hans Christian Gram leta 1884. Barvanje po Gramu bakterije razvrsti v dve glavni skupini, imenovani gram pozitivne in gram negativne, ki sta zelo pomembni pri razvrščanju in identifikaciji bakterij. Mikrobiologi v svojih študijah obarvajo gram kot začetni korak pri karakterizaciji bakterij.
Bakterije so razvrščene glede na razlike v njihovi celični steni. Gram pozitivne bakterije so sestavljene iz debele plasti peptidoglikana v njihovi celični steni, gram negativne bakterije pa so sestavljene iz tanke plasti peptidoglikana v svoji celični steni. Izid obarvanja po gramih bo temeljil na razliki v debelini peptidoglikanske plasti celične stene.
Obarvanje Gramsa izvedemo s štirimi različnimi reagenti in sicer; primarni madež, mordant, sredstvo za razbarvanje in nasprotni madež. Kristalna vijolica in safranin se uporabljata kot primarna in nasprotna madeža, grami joda in 95-odstotni alkohol pa kot žila in razbarvalec. Osnovni koraki madežev v gramih so naslednji;
- Na čistem steklenem stekelcu pripravimo bakterijski razmaz, ga segrejemo in ohladimo.
- Razmaz prelijemo s kristalno vijolično za 1-2 minuti.
- Razmaz splaknite s počasi tekočo vodo iz pipe, da odstranite odvečne madeže.
- Na razmaz za 1 minuto nanesemo gramov jod.
- Razmaz splaknemo s počasi tekočo vodo iz pipe
- Razmaz speremo z 95% alkoholom 2–5 sekund in speremo s počasi tekočo vodo iz pipe.
- Razmaz 1 minuto obarvamo s safraninom
- Razmaz splaknemo s počasi tekočo vodo iz pipe, posušimo in opazujemo pod mikroskopom.
Na koncu gramnega madeža bomo v roza barvi opazili gram negativne bakterije, v vijolični pa gram pozitivne bakterije.
Slika 01: Gram negativne in gram pozitivne bakterije
O izidu madeža v gramih odloča debelina plasti peptidoglikana v njihovi celični steni. Med razbarvanjem se primarno madež in žila zlahka odstranijo iz gram negativnih bakterij in postanejo brezbarvni, saj imajo tanko plast peptidoglikana. Primarni madež se zadrži v gram pozitivnih bakterijah, saj imajo debelo plast peptidoglikana. Nasproten madež zaradi zadrževanja primarnega madeža ne bo učinkovit za gram pozitivne bakterije. Tako bodo v gramih pozitivne bakterije, to je v vijolični barvi, vidne gram pozitivne bakterije. Nasprotni madež bo obarval gram negativne bakterije in bodo vidne v barvi izbirnega materiala, to je v barvi safranina. Zato je bakterije enostavno razvrstiti v dve skupini po gramov in je dragoceno pri diferenciaciji in identifikaciji bakterij.
Kaj je Acid Fast?
Kisloobstojnost je fizikalna lastnost nekaterih bakterij, zlasti njihova odpornost na razbarvanje s kislinami med postopki obarvanja. Ko se ti organizmi obarvajo, se upirajo postopkom razbarvanja na osnovi razredčenih kislin in / ali etanola, ki so običajni v mnogih protokolih za obarvanje. Tako imajo ti organizmi ime "kislo hitro". Ta lastnost je prikazana zaradi visoke vsebnosti voskastih snovi (mikolinske kisline) v njihovih celičnih stenah. Ta test je ključnega pomena za identifikacijo Mycobacterium tuberculosis.
Slika 2: Kislinsko hitre mikobakterije
Ta kislinsko hiter madež je razvil Paul Ehrlich leta 1882. Ehrlichovo kislinsko hitro tehniko je spremenil Ziehl-Neelsen in se zdaj uporablja pogosteje. V postopek kislega hitrega barvanja so vključeni trije različni reagenti. Carbol fuschin se uporablja kot primarni madež. Kot razbarvalec se uporablja kisli alkohol. Metilen modra se uporablja kot nasprotni madež. Postopek obarvanja se izvede na naslednji način.
- Primarni madež (karbol fuksin) se nanese na pritrjeni primerek na drsniku (vse celice bodo obarvane v rdeči barvi).
- Diapozitiv se segreva s parjenjem 5 minut, kar madeže pravilno odpelje v celice.
- Nato dodamo raztopino za razbarvanje (s tem odstranimo rdeče barvilo iz vseh celic, razen kislo hitrih bakterij).
- Metilen modro dodamo kot nasprotni madež (obarva vse razbarvane bakterijske celice).
- Kisloobstojne bakterije ostanejo rdeče, medtem ko nekislinsko odporne bakterije obarvajo modro.
Kakšne so podobnosti med madežem po Gramu in kislino hitro?
- Barvanje po Gramu in hitra kislina sta dve različni tehniki barvanja.
- Obe tehniki razvrščata bakterije v dve skupini.
- Obe tehniki uporabljata dva madeža in enega za razbarvanje.
Kakšna je razlika med hitrostjo madežev po Gramu in kislino?
Diff Article Sredina pred mizo
Gram Stain vs Acid Fast |
|
| Obarvanje po Gramu je diferencialna tehnika obarvanja, ki bakterije loči v dve skupini po Gramu pozitivne bakterije in po Gramu negativne bakterije. | Acid Fast madež je diferencialni madež, ki se uporablja za prepoznavanje kislo hitrih organizmov od ne kislinsko hitrih organizmov. |
| Primarni madež | |
| Kristalno vijolična je najpogosteje uporabljen primarni madež pri barvanju po gramih. | Carbol fuchsin je primarni madež, ki se hitro uporablja v kislini. |
| Sredstvo za razbarvanje | |
| 95-odstotni alkohol se uporablja kot sredstvo za razbarvanje v gramnih madežih. | Kisli alkohol se uporablja kot sredstvo za razbarvanje v kislih hitro. |
| Števec madežev | |
| Gram madež uporablja safranin kot nasprotni madež. | Kislinsko hiter madež uporablja metilensko modro kot protibarvni madež. |
| Opazovanje | |
| Gram negativne bakterije opazimo v rumeni barvi, gram pozitivne bakterije pa v vijolični barvi. | Kislinsko hitre bakterije so opažene v rdeči barvi, bakterije, ki niso hitro kisle, pa v modri barvi. |
Povzetek - Gram Stain vs Acid Fast
Vizualizacija mikroorganizmov v živem stanju je težka. Zato se biološke madeže in postopke barvanja pogosto uporabljajo za preučevanje njihovih lastnosti. Diferencialno obarvanje je ena od tehnik obarvanja, ki se uporablja za razlikovanje bakterij. Barvanje po Gramu in kislo hitro obarvanje sta dve različni tehniki barvanja. Barvanje po Gramu razlikuje gram negativne bakterije in gram pozitivne bakterije glede na debelino njihovih celičnih sten. Kislo hitro obarvanje na osnovi vsebnosti mikolne kisline v celični steni razlikuje kislo odporne bakterije od nekislo hitrih. To je razlika med kislinsko hitrim in gramnim madežem.
Prenesite PDF različico Gram Stain vs Acid Fast
Lahko prenesete različico tega članka v obliki PDF in jo uporabite za uporabo brez povezave, kot je navedeno v opombi. Prenesite različico PDF tukaj Razlika med hitrostjo madežev po Gramu in kislino.
