Ključna razlika - Gel za zlaganje proti ločevalnemu gelu
Izraza gel za zlaganje in ločevalni gel se uporabljata pri razlagi tehnike SDS-PAGE. SDS-PAGE ali elektroforeza v natrijevem dodecil sulfat-poliakrilamidnem gelu je laboratorijska tehnika, ki se uporablja za ločevanje beljakovinskih molekul glede na njihovo molekulsko maso. Teorija tehnike temelji na tem, da beljakovine z različno molekulsko maso kažejo različne stopnje migracije; molekule z nizko molekulsko maso se selijo hitreje, molekule z visoko molekulsko maso pa počasi. Medij za migracijo je gel. Obstajata dve vrsti gelov, imenovani geli za zlaganje in ločevalni geli. Ključna razlika med zlagalnim gelom in ločilnim gelom je, da je pH zložljivega gela 6,8, medtem ko je pH ločilnega gela 8,8.
VSEBINA
1. Pregled in ključna razlika
2. Kaj je gel za zlaganje
3. Kaj je ločevalni gel
4. Razmerje med zlaganjem gela in ločevalnim gelom
5. Primerjava ob strani - Zlaganje gela in ločevalni gel v obliki tabele
6. Povzetek
Kaj je gel za zlaganje?
Gel za zlaganje je nizko koncentriran poliakrilamidni gel, ki ga v tehniki SDS-PAGE položimo na vrh bolj koncentriranega ločilnega gela (ločevalni gel). Gel za zlaganje se uporablja za izboljšanje ločljivosti elektroforeze. Ločljivost se poveča zaradi razlike med koncentracijami gela za zlaganje in ločevalnega gela, ki vpliva na beljakovine v vzorcu. Ker je koncentracija poliakrilamida v zložljivem gelu nizka, je velikost por večja. To pomaga tudi pri povečanju ločenosti.
Zložljivi gel je ohlapen poliakrilamidni gel z velikimi porami približno 7% poliakrilamida. Te pore ne delujejo kot pomembna ovira za velike beljakovinske molekule. Zato ta gel nekoliko vpliva na gibljivost teh beljakovin. To omogoča ločevanje glede na gibljivost in velikost beljakovin, tako da jih koncentriramo med dva gela.
Slika 01: Akrilamidni gel SDS-PAGE
PH gela za zlaganje je 6,8. Njegov pH je kisel kot pri raztapljanju gela za 2 pH enoti. Ta pH pomeni manjšo ionsko jakost in s tem večjo električno upornost. To izzove gibljivost beljakovin kot drugi nabiti delci, prisotni v gelu.
Kaj je ločevalni gel?
Ločevalni gel ali ločilni gel tehnike SDS-PAGE je visoko koncentriran poliakrilamidni gel, ki je nameščen na vrhu nizko koncentriranega gela za zlaganje. Ločilni gel vsebuje veliko količino poliakrilamida (10%). PH tega gela se vzdržuje kot pH = 8,8, kar je višja raven pH od gela za zlaganje.
Slika 02: Aparat za elektroforezo v gelu
Ko beljakovinske molekule dosežejo ločevalni gel, se migracija teh molekul upočasni, ker je ločevalni gel visoko koncentriran gel z majhno velikostjo por, ki lahko deluje kot precejšnja ovira za gibanje beljakovinskih molekul. Ta upočasnitev omogoča drugim beljakovinam, da se počasi selijo, da nastane ozek, koncentriran pas med dvema geloma.
Kakšna je povezava med zlaganjem gela in ločevalnim gelom?
V isti napravi se uporabljata tako zložljivi kot ločevalni gel
Kakšna je razlika med zlaganjem in ločevanjem gela?
Diff Article Sredina pred mizo
Zložitveni gel proti ločevalnemu gelu |
|
| Gel za zlaganje je nizko koncentriran poliakrilamidni gel, ki ga v tehniki SDS-PAGE položimo na vrh bolj koncentriranega ločilnega gela (ločevalni gel). | Ločevalni gel ali ločilni gel tehnike SDS-PAGE je visoko koncentriran poliakrilamidni gel, ki je nameščen na vrhu nizko koncentriranega gela za zlaganje. |
| Umestitev | |
| Gel za zlaganje položimo na ločevalni (ločevalni) gel. | Ločevalni gel se položi na dno posode, ki se uporablja za gelsko elektroforezo. |
| Koncentracija | |
| Koncentracija gela za zlaganje je velika. | Koncentracija ločevalnega gela je nizka. |
| Vsebnost poliakrilamida | |
| Gel za zlaganje vsebuje približno 7% poliakrilamida. | Ločevalni gel vsebuje približno 10% poliakrilamida. |
| pH | |
| PH gela za zlaganje je 6,8. | PH ločevalnega gela je 8,8. |
| Velikost por | |
| Velike velikosti por so prisotne v zložljivem gelu. | Majhne velikosti por so prisotne v ločevalnem gelu. |
| Resolucija | |
| Gel za zlaganje daje boljšo ločljivost. | Ločevalni gel daje slabo ločljivost. |
Povzetek - Gel za zlaganje proti ločevalnemu gelu
Gel za zlaganje in ločevalni gel sta dve vrsti poliakrilamidnih gelov, ki se uporabljata za boljše ločevanje beljakovinskih molekul v danem vzorcu. Razlika med zlagalnim gelom in ločilnim gelom je v tem, da je pH zložljivega gela 6,8, medtem ko je pH ločevalnega gela 8,8.
