Ključna razlika - pretočna citometrija v primerjavi s FACS
V okviru celične teorije so celice osnovna strukturna in funkcionalna enota vseh živih organizmov. Razvrščanje celic je metodologija, ki se uporablja za ločevanje različnih celic glede na fiziološke in morfološke značilnosti. Lahko so znotrajceličnih ali zunajceličnih značilnosti. Medsebojno delovanje DNA, RNA in beljakovin velja za znotrajcelične interaktivne lastnosti, oblika, velikost in različne površinske beljakovine pa za zunajcelične lastnosti. V sodobni znanosti so metodologije sortiranja celic pomagale različnim raziskavam pri bioloških študijah in tudi pri vzpostavljanju novih načel z raziskavami na področju medicine. Razvrščanje celic poteka po različnih metodologijah, ki vključujejo tako primitivne z manj opreme kot tudi napredne tehnološke metodologije z uporabo dovršenih strojev. Glavne uporabljene metodologije so pretočna citometrija, sortiranje s fluorescentno aktivirano celico (FACS), izbira magnetnih celic in sortiranje posameznih celic. Pretočna citometrija in FACS sta razvita za razlikovanje celic glede na njihove optične lastnosti. FACS je specializirana vrsta pretočne citometrije. Pretočna citometrija je metodologija, ki se uporablja med analizo heterogene populacije celic glede na različne molekule, velikost in prostornino celične površine, ki omogoča preiskavo posameznih celic. FACS je postopek, s katerim vzorčno zmes celic razvrstimo glede na njihove značilnosti sipanja svetlobe in fluorescence v dve ali več posod. To je ključna razlika med pretočno citometrijo in FACS.
VSEBINA
1. Pregled in ključna razlika
2. Kaj je pretočna citometrija
3. Kaj je FACS
4. Podobnosti med pretočno citometrijo in FACS
5. Vzporedna primerjava - pretočna citometrija v primerjavi s FACS v tabelarni obliki
6. Povzetek
Kaj je pretočna citometrija?
Pretočna citometrija je metoda, ki se uporablja za preučevanje in določanje izražanja znotrajceličnih molekul in celične površine ter za določanje in karakterizacijo različnih tipov celic. Uporablja se tudi za določanje prostornine in velikosti celic ter za oceno čistosti izoliranih subpopulacij. To omogoča približno istočasno oceno več parametrov posameznih celic. Pretočna citometrija se uporablja pri merjenju intenzivnosti fluorescence, ki nastane zaradi fluorescentno označenih protiteles, ki pomagajo prepoznati beljakovine ali ligande, ki se vežejo na povezane celice.
Slika 01: Pretočna citometrija
Pretočna citometrija na splošno vključuje predvsem tri podsisteme. So fluidniki, elektronika in optika. Pri pretočni citometriji je na voljo pet glavnih komponent, ki se uporabljajo pri sortiranju celic. So pretočna celica (tok tekočine, ki se uporablja za njihov transport in poravnavo celic za postopek optičnega zaznavanja), merilni sistem (lahko iz različnih sistemov, vključno z živosrebrnimi in ksenonskimi žarnicami, vodno hlajenimi ali nizkoenergijski zračno hlajeni laserji ali diodni laserji), ADC; Analogno-digitalni pretvornik, ojačevalni sistem in računalnik za analizo. Pridobivanje je postopek zbiranja podatkov iz vzorcev z uporabo pretočnega citometra. Ta postopek posreduje računalnik, ki je povezan s pretočnim citometrom. Programska oprema, ki je prisotna v računalniku, analizira podatke, ki jih računalnik dovaja iz pretočnega citometra. Programska oprema ima tudi možnost prilagajanja parametrov eksperimenta z nadzorom pretočnega citometra.
Kaj je FACS?
V okviru pretočne citometrije je sortiranje celic, aktivirano s fluorescenco (FACS), metoda, ki se uporablja pri diferenciaciji in sortiranju vzorca mešanice bioloških celic. Celice so ločene od dveh ali več vsebnikov. Metoda razvrščanja temelji na fizičnih lastnostih celice, ki vključujejo značilnosti sipanja svetlobe in fluorescenčne celice. To je pomembna znanstvena tehnika, s katero lahko dobimo zanesljive kvantitativne in kvalitativne rezultate fluorescenčnih signalov, ki jih oddaja vsaka celica. Med FACS je bila najprej pridobljena mešanica celic; suspenzija je usmerjena v središče ozkega toka tekočine, ki hitro teče. Pretok tekočine je zasnovan tako, da ločuje celice v suspenziji glede na premer vsake celice. Na tok suspenzije se uporabi mehanizem vibracij, ki povzroči nastanek posameznih kapljic.
Slika 02: FACS
Sistem je kalibriran tako, da ustvari eno kapljico z eno celico. Tik pred nastankom kapljic se suspenzija toka premakne vzdolž naprave za merjenje fluorescence, ki zazna značilnost fluorescence za vsako celico. Na mestu nastanka kapljic je nameščen električni polnilni obroč, ki je pred merjenjem intenzivnosti fluorescence v obroč induciran naboj. Ko kapljice nastanejo iz suspenzijskega toka, se v njih ujame naboj, ki nato vstopi v elektrostatični deformacijski sistem. Glede na naboj sistem preusmeri kapljice v različne posode. Način polnjenja se razlikuje glede na različne sisteme, ki se uporabljajo v sistemu FACS. Oprema, ki se uporablja v sistemu FACS, je znana kot sorter za aktiviranje s fluorescenco.
Kakšna je podobnost med pretočno citometrijo in FACS?
Pretočna citometrija in FACS sta razvita za razlikovanje celic glede na njihove optične lastnosti
Kakšna je razlika med pretočno citometrijo in FACS?
Diff Article Sredina pred mizo
Pretočna citometrija proti FACS |
|
| Pretočna citometrija je metodologija, ki se uporablja med analizo heterogene populacije celic glede na različne molekule, velikost in prostornino celične površine, ki omogoča preiskavo posameznih celic. | FACS je postopek, s katerim vzorčno zmes celic razvrstimo glede na njihove značilnosti sipanja svetlobe in fluorescence v dve ali več posod. |
Povzetek - Pretočna citometrija v primerjavi s FACS
Celica je osnovna strukturna in funkcionalna enota vseh živih organizmov. Razvrščanje celic je postopek, s katerim se celice izolirajo in razdelijo v različne kategorije glede na njihove znotrajcelične in zunajcelične lastnosti. Pretočna citometrija in FACS sta dve pomembni metodologiji pri razvrščanju celic. Oba procesa sta razvita za razlikovanje celic glede na njihove optične lastnosti. Pretočna citometrija je metodologija, ki se uporablja med analizo heterogene populacije celic glede na različne molekule, velikost in prostornino celične površine, ki omogoča preiskavo posameznih celic. FACS je postopek, s katerim vzorčno zmes celic razvrstimo glede na njihove značilnosti sipanja svetlobe in fluorescence v dve ali več posod. To je razlika med pretočno citometrijo in FACS.
Prenesite PDF različico Flow Cytometry vs FACS
Lahko prenesete različico tega članka v obliki PDF in jo uporabite za uporabo brez povezave, kot je navedeno v opombi. Prenesite različico PDF tukaj Razlika med pretočno citometrijo in FACS
