Ključna razlika med gram pozitivnimi in gram negativnimi bakterijami je v tem, da imajo gram pozitivne bakterije debelo plast peptidoglikana, zato se pojavijo v vijolični barvi, medtem ko imajo gram negativne bakterije tanko plast peptidoglikana, zato se na koncu tehnike barvanja po gramih pojavijo v rožnati barvi.
Bakterije so vseprisotni prokarionti, ki so enocelični in mikroskopski. Skupaj z Arheji pripadajo kraljestvu Monera. Poleg tega imajo zelo preprosto celično organizacijo. Strukturno jim primanjkuje notranjih predelkov; jedro in na membrano vezane druge organele. Poleg tega lahko bakterije razvrstimo na podlagi več značilnosti, kot so oblika, genetska podoba, sestava celične stene, število bičkov, prehrana, biokemične reakcije itd. Obarvanje po Gramu je ena od tehnik, ki se pogosto uporabljajo pri identifikaciji in karakterizaciji bakterij. Glede na obarvanje po gramih obstajata dve kategoriji bakterij, kot so gram pozitivne in gram negativne bakterije. Ti dve skupini bakterij se med seboj razlikujeta po sestavi celične stene. Zato med tehniko barvanja v gramih obarvajo različne barve.
