Ključna razlika - Phusion vs Taq polimeraza
DNA polimeraze so široko uporabljeni encimi v tehnikah molekularne biologije in so naravno prisotne tudi v vseh organizmih, ki se podvajajo. So ključni polimerizacijski encimi, ki sodelujejo med razmnoževanjem. DNA polimeraza je sposobna dodati nukleotide na prosti 3 'konec verige DNA, s čimer povzroči podaljšanje nove verige. Trenutno je zaradi razvoja molekularne biologije na področju diagnostike bolezni in industrijske uporabe pomembno proizvajati polimeraze z različnimi koristnimi lastnostmi. To poveča natančnost metode in jo naredi hitrejšo. Phusion in Taq polimeraza sta dva komercialno proizvedena termostabilna encima polimeraze, ki se uporabljata v posebnih molekularnih aplikacijah. Phusion je DNA polimeraza, izolirana iz Pyrococcus furiosus, in se v glavnem uporablja v poskusih kloniranja za povečanje zvestobe. Taq DNA polimeraza je standardna DNA polimeraza, ki se uporablja v verižni reakciji polimeraze (PCR), in je izolirana iz termostabilne bakterije; Thermus aquaticus. Ključna razlika med obema encimoma je izvorni mikroorganizem. Phusion je izoliran iz ekstremofila, Pyrococcus furiosus, medtem ko je Taq polimeraza izoliran iz termofila, Thermus aquaticus. Taq polimeraza je izolirana iz termofila, Thermus aquaticus. Taq polimeraza je izolirana iz termofila, Thermus aquaticus.
VSEBINA
1. Pregled in ključna razlika
2. Kaj je Phusion
3. Kaj je Taq polimeraza
4. Podobnosti med Phusion in Taq polimerazo
5. Vzporedna primerjava - Phusion v primerjavi s Taq polimerazo v tabelarni obliki
6. Povzetek
Kaj je Phusion?
Fuzijska DNA polimeraza je nova polimeraza, ki se proizvaja z izolacijo encima iz Pyrococcus furiosus, ki je ekstremofilna arheja. Ti mikrobi prebivajo v izredno visokih temperaturah, zaradi česar je polimeraza zelo toplotno stabilna polimeraza. Fuziona polimeraza se uporablja za doseganje izjemne zvestobe običajni termostabilni polimerazi; Taq polimeraza. Fuzijska polimeraza lahko ojača dolge predloge do 7,5 kb genomske DNA. Optimalna polimerizacijska sposobnost Phusion polimeraze je pri 72 0 C. Phusion se uporablja tudi pri kloniranju produktov za zaporedje, analizo ekspresije in analizo mutacij.
Fuzijska DNA polimeraza ima 3 '- 5' eksonukleazno aktivnost. To omogoča lektoriranje novo sintetiziranega pramena po sintezi. Zato je neusklajenost nukleotidov enostavno popraviti. Tako ima manjšo stopnjo napak. Splošne prednosti Phusion polimeraze so;
- Izjemna zvestoba
- Velika hitrost in skrajšan čas podaljšanja
- Robustne reakcije in zahtevajo minimalno optimizacijo
- Visoki donosi
Slika 01: Fuzije
Glavna pomanjkljivost Phusion polimeraze je ta, da se inhibira v prisotnosti deoksiuridin trifosfata (dUTP). Ko se dUTP kopičijo v reakcijski zmesi, lahko zavira delovanje Phusion polimeraze. To preprečimo z obdelavo reakcijske zmesi z dUTPazo pred dodajanjem encima. Trenutno se kot zdravilo proti tej težavi namesto Phusion polimeraze uporablja različica Phusion polimeraze, odporne proti dUTP, znana kot Pfu Turbo.
Kaj je Taq polimeraza?
Izum Taq DNA polimeraze je revolucioniral področje molekularne biologije. Rešila je glavni problem pri pomnoževanju DNA. Taq DNA polimeraza je toplotno stabilen polimerazni encim, ekstrahiran in izoliran iz termofilne bakterije Thermus aquaticus. Odkritje teh encimov vodi do razvoja PCR. Ta encim je omogočil uporabo verižne reakcije s polimerazo pri ojačitvi DNA namesto običajnih mučnih tehnik kloniranja. PCR se zdaj uporablja v molekularni diagnostiki, kmetijstvu in industriji, pri čemer je tehniki dodano veliko novih sprememb.
Slika 02: Taq polimeraza
Taq DNA polimeraza deluje pri optimalnem temperaturnem območju med 72 0 C - 80 0 C. Taq DNA polimeraza zahteva kofaktor; magnezija za njegovo delovanje. Taq polimeraza nima sposobnosti lektoriranja 3 '- 5', zato je stopnja napak Taq DNA polimeraze visoka v primerjavi z novejšimi vrstami DNA polimeraz, kot je Phusion polimeraza itd. Toda priljubljenost Taq DNA polimeraze ostaja enako po vsem svetu znanosti zaradi priročnosti in prilagodljivosti encima.
Kakšne so podobnosti med Phusion in Taq polimerazo?
- Encimi Phusion in Taq polimeraze so polimerizirajoči encimi, ki lahko dodajo nukleotide na 3 'prosti konec verige DNA.
- Polimeraze Phusion in Taq zahtevajo zaporedje temeljnih premazov za začetek polimerizacije.
- Polimeraze Phusion in Taq so toplotno stabilne.
- Polimeraze Phusion in Taq se uporabljajo v PCR mehanizmih za ojačanje DNA.
- Ko dodajamo polimerazo v reakcijsko zmes, dodajamo tako Phusion kot Taq polimeraze zadnje, da zagotovimo učinkovitost encima.
- Polimeraze Phusion in Taq se komercialno sintetizirajo za eksperimentalne namene molekularne biologije.
- Polimeraze Phusion in Taq zahtevajo kofaktor za dokončanje svoje funkcije.
Kakšna je razlika med Phusion in Taq polimerazo?
Diff Article Sredina pred mizo
Phusion vs Taq polimeraza |
|
| Phusion je DNA polimeraza, izolirana iz Pyrococcus furiosus, in se v glavnem uporablja v poskusih kloniranja za povečanje zvestobe. | Taq DNA polimeraza je standardna DNA polimeraza, ki se uporablja v verižni reakciji polimeraze (PCR), in je izolirana iz termostabilne bakterije Thermus aquaticus. |
| Izvorni organizem | |
| Fuzija se pridobiva iz ekstremofilnih arhej - Pyrococcus furiosus. | Ta literarna dela segajo od obdobja kolonizacije do obdobja dekolonizacije. |
| Sposobnost lektoriranja | |
| 3 '- 5' sposobnost branja je prisotna v Phusionu. | 3 '- 5' dokazne sposobnosti branja v Taq polimerazi ni. |
| Zvestoba | |
| Visoka zvestoba je s Phusionom. | Taq polimeraza kaže nizko zvestobo. |
| Ojačitev | |
| Phusion je sposoben ojačati dolge fragmente DNA. | Taq polimeraza lahko ojača veliko krajše fragmente DNA. |
| dUTP Zastrupitev | |
| Fuzijsko delovanje zavira akumulacija nenavadno. | Taup polimeraze dUPT ne zavira. |
Povzetek - Phusion vs Taq polimeraza
Phusion in Taq DNA polimeraza sta dve toplotno stabilni polimerazi, ki se uporabljata v tehnikah PCR. Phusion je polimeraza, izolirana iz ekstremofila, Pyrococcus furiosus, medtem ko je Taq izoliran iz termostabilne bakterije Thermus aquaticus. Odkritje Taq DNA polimeraze vodi do izuma PCR. Phusion ima številne prednosti pred Taqom, zaradi česar je Phusion boljša možnost za izdelavo DNK z visoko natančnostjo. Vendar se Taq polimeraza še vedno uporablja kot standardni polimerazni encim v PCR. To je razlika med Phusion in Taq polimerazo.
