Ključna razlika - RNASE A proti RNASE H
Ribonukleaze so nukleaze, ki specifično razgradijo RNA v manjše enote. Razdelimo jih lahko v dve kategoriji; endoribonukleaze in eksoribonukleaze. Endoribonukleaza je endonukleaza, ki lahko razgradi enoverižno ali dvoverižno RNA. Razcepi fosfodiesterske vezi znotraj polinukleotidne verige RNA. Primeri so RNaza A, RNaza III, RNaza T1, RNaza P in RNaza H. Eksoribonukleaza je eksonukleaza, ki razgradi RNA z odstranitvijo končnih nukleotidov bodisi s 5 'ali 3' konca molekule RNA. Primeri so RNaza R, RNaza II, RNaza D in RNaza PH. Ključna razlika med RNASE A in RNASE H je v tem, da je RNaza A trebušna slinavka ribonukleaza, ki posebej razgradi enoverižno RNA na manjše komponente, medtem ko je RNase H nespecifični encim, ki cepi RNA v hibridni RNA-DNA na manjše enote prek hidrolitski mehanizem.
VSEBINA
1. Pregled in ključna razlika
2. Kaj je RNASE A
3. Kaj je RNASE H
4. Podobnosti med RNASE A in RNASE H
5. Vzporedna primerjava - RNASE A v primerjavi z RNASE H v tabelarni obliki
6. Povzetek
Kaj je RNASE A?
RNaza A je ribonukleaza trebušne slinavke, ki posebej razcepi nesparene ostanke citozina in uracila na 3 'koncu enojne RNA. RNaza H deluje pri višji koncentraciji soli (0,3M ali večja koncentracija NaCl). Hidrolitska reakcija je v dveh korakih. Tvori 3 'fosforilirani produkt preko 2', 3 'cikličnega monofosfatnega intermediata. Čeprav je specifična za enoverižno RNA pri višji koncentraciji soli, lahko razgradi tudi dvoverižno RNA in RNA v hibridu RNA-DNA pri nižji koncentraciji NaCl (nižji od 0,3 M NaCl).
Bruce Merrifield je najprej sintetiziral ta encim. RNaza A je zelo priljubljen encim v molekularnih raziskavah. RNaza A goveje trebušne slinavke je primer RNaze A. In je eden najtrdnejših encimov, ki se uporabljajo v laboratoriju. Ta encim za svojo aktivnost ne potrebuje kofaktorja. Je zelo termostabilen encim. RNaza A je prvi encim in tretji protein, pri katerem je bilo zaznano pravilno aminokislinsko zaporedje. Ta encim je zelo majhen s 124 aminokislinami in molekulsko maso 12600da. In ima štiri ostanke histidina (His 12 in His 119, ki sodelujejo v katalitični reakciji).
Slika 01: RNaza A
RNazo A lahko izoliramo s prekuhavanjem surovega vzorca. Ko zavre, vsi drugi encimi razgradijo preostalo RNazo A. RNaza A je neverjetno stabilen encim. Ta encim zavira z zaviralci ribonukleaze proteinov, kompleksov težkih kovin in uridin vanadata.
Kaj je RNaza H?
RNaza H je nespecifični encim ribonukleaze, ki lahko s hidrolitično reakcijo razgradi RNA v hibridu RNA-DNA. RNaza H cepi 3'- OP vez RNK v hibridu RNA-DNA. Na koncu proizvede 3'OH in 5 'fosfatne izdelke. Pri replikaciji DNA igra ključno vlogo z odstranjevanjem primerka RNA, potem ko nastanejo nove verige DNA. V laboratorijskih razmerah specifično razgradi RNA v hibridni RNA-DNA, ne pa tudi DNA in nehibridizirani RNA. In ta encim se običajno uporablja za uničenje predloge RNA, potem ko se med sintezo cDNA oblikuje prva komplementarna veriga DNA.
Slika 02: RNaza H
RNaza H se uporablja tudi pri testih zaščite nukleaze. Lahko ga vključimo tudi v odstranjevanje poli A repa iz mRNA. RNaza H lahko uniči nekodirajočo RNA znotraj in zunaj celice. Kovinski ioni so potrebni kot kofaktorji za to aktivnost beljakovin. Za zaviranje encima RNaze H lahko uporabimo kelator (EDTA).
Kakšne so podobnosti med RNASE A in RNASE H?
- Oboje je po naravi beljakovinsko.
- Oba sta endoribonukleaza
- Oba lahko razgradita RNA.
- Oba izvajata hidrolitične reakcije.
- Molekularni laboratoriji uporabljajo oboje.
Kakšna je razlika med RNASE A in RNASE H?
Diff Article Sredina pred mizo
RNASE A vs RNASE H |
|
| RNaza A je ribonukleaza trebušne slinavke, ki pri večji koncentraciji soli posebej odcepi 3 'konec neparnih ostankov citozina in uracila enoverižne RNA. | RNaza H je nespecifični encim ribonukleaze, ki lahko s hidrolitično reakcijo razgradi RNA v hibridu RNA-DNA. |
| Narava cepljenja RNK | |
| RNaza A posebej cepi enoverižno RNA pri višji koncentraciji soli. | RNaza H cepi RNA v hibridu RNA-DNA. |
| Potreba po dejavnikih dejavnikov | |
| RNaza A za svojo aktivnost ne potrebuje kofaktorjev. | RNaza H potrebuje kovinske ione kot kofaktorje za svojo aktivnost. |
| Zaviralci beljakovinske aktivnosti | |
| Kompleksi zaviralcev ribonukleaze, beljakovin težkih kovin in uridin vanadata zavirajo aktivnost RNAze A. | Kelator (EDTA) zavira aktivnost RNaze H. |
| Odstranjevanje primerja RNA pri replikaciji DNA | |
| RNaza A se ne uporablja za odstranjevanje primerkov RNA pri replikaciji DNA. | RNaza H se uporablja za odstranjevanje primerkov RNA pri replikaciji DNA |
| Odstranjevanje predloge DNA v komplementarni sintezi DNA (C-DNA) | |
| RNaza A se ne uporablja za odstranjevanje predloge RNA med komplementarno sintezo DNA (C-DNA). | RNaza H se uporablja za odstranjevanje vzorcev RNA med komplementarno sintezo DNA (C-DNA). |
| Odstranjevanje poli-A-repa v mRNA, hibridizirani v Oligo (dt) | |
| RNaza A se ne uporablja za odstranjevanje "repa poli-A" v mRNA, hibridizirani v oligo (dt). | RNaza H se uporablja za odstranjevanje "poli-A repa" v mRNA, hibridizirani v oligo (dt) |
Povzetek - RNASE A vs RNASE H
Ribonukleaze so nukleazni encimi, ki imajo sposobnost cepiti RNA na manjše enote. Gre za dve vrsti; endoribonukleaze in eksoribonukleaze. Endoribonukleaza je endonukleaza, ki ima sposobnost razgradnje enoverižne ali dvoverižne RNA. In cepi fosfodiestersko vez znotraj polinukleotidne verige RNA. RNaza A in RNaza H sta dve endoribonukleazi. RNaza A je ribonukleaza trebušne slinavke, ki specifično cepi neparne ostanke citozina in uracila na 3 'koncu enojne RNA pri višji koncentraciji soli. RNaza H je nespecifični encim ribonukleaze, ki lahko s hidrolitično reakcijo razgradi RNA v hibridu RNA-DNA. To je razlika med RNazo A in RNazo H.
Prenesite PDF RNASE A v primerjavi z RNASE H
Lahko prenesete različico tega članka v obliki PDF in jo uporabite za uporabo brez povezave, kot je navedeno v opombi. Prosimo, prenesite PDF različico tukaj Razlika med RNASE A in RNASE H
