Ključna razlika - Transformanti vs rekombinanti
Rekombinacija in transformacija sta dva ključna koraka v genskem inženiringu, kjer se značilnosti organizma namerno spreminjajo z manipulacijo z njegovim genskim materialom. Rekombinacija je postopek, pri katerem se tuja DNA vključi v vektorski genom in nastane molekula rekombinantne DNA. Transformacija je naslednji korak, pri katerem se v gostiteljski organizem vnese rekombinantna molekula. Gostiteljska celica ali organizem olajša izražanje rekombinantne molekule. Ključna razlika med transformanti in rekombinanti je, da so transformanti celice ali organizmi, ki sprejmejo rekombinantno molekulo znotraj in olajšajo izražanje, medtem ko so rekombinanti vektorji, ki omogočajo vstavitev tuje DNA v njen genom in transport v gostiteljske transformante za izražanje.
VSEBINA
1. Pregled in ključna razlika
2. Kaj so transformatorji
3. Kaj so rekombinanti
4. Vzporedna primerjava - Transformanti vs rekombinanti
5. Povzetek
Kaj so Transformanti?
Transformanti so celice ali organizmi, v katerih se za izražanje prevzame rekombinantna DNA. Bakterije se pogosto uporabljajo kot gostiteljski organizmi v genskem inženiringu, saj jih je v laboratorijskih pogojih enostavno gojiti, razmnoževati in obdelovati, postopek preoblikovanja pa je enostaven v primerjavi z drugimi organizmi. Najbolj priljubljena gostiteljska bakterija, ki se uporablja v genskem inženiringu, je bakterija E coli.
Med postopkom transformacije se gostiteljske celice spodbudijo, da prevzamejo rekombinante. Nekatere gostiteljske celice pa ne prevzamejo rekombinantnih molekul. Znani so kot netransformanti, celice, ki vsebujejo molekule rekombinantne DNA, pa kot transformanti. Izbira transformantov iz netransformantov poteka z uporabo izbirnih markerjev v molekularni biologiji. Izbirni markerji se vstavijo v vektorski genom skupaj z vložkom DNA. Pogosto uporabljeni izbirni markerji so geni, odporni na antibiotike. Markerski geni olajšajo diferenciacijo transformantov in nadaljujejo postopek. Po procesu transformacije bakterijo gojimo v gojišču, ki vsebuje antibiotik. Na tem mediju lahko rastejo samo transformanti, saj imajo rekombinante v sebi.
Ko se molekula rekombinantne DNA transformira znotraj gostiteljskega organizma, se lahko tuja DNA integrira v genom gostiteljske celice ali ostane neintegrirana v citoplazmi. Vendar pa se izražanje in razmnoževanje tuje DNK pojavita v gostiteljskem organizmu in dajeta želeni rezultat procesa.
Kaj so rekombinanti?
Rekombinant je organizem ali celica, ki ima rekombinirani genom, ki vsebuje tujo DNA. Rekombinanti so rezultat procesa genskega inženiringa. Umetno so izdelani in vitro z vstavitvijo genov, ki nas zanimajo, in spreminjanjem genoma. Pogosto bakterijski plazmidi in bakteriofagi delujejo kot rekombinanti v genskem inženiringu. Ima himere različnih DNK. Rekombinantna molekula DNA prenaša tujo DNA v gostiteljski organizem in jo izrazi ter tvori želeni produkt.
Rekombinantne molekule so zgrajene z uporabo restrikcijskih endonukleaz in DNA ligaz. Želeni fragment DNA se loči od prvotnega organizma in vstavi v vektor, da postane rekombinant za transformacijo. Rezanje genov, ki nas zanima, in odpiranje vektorskega organizma je treba opraviti z istim restrikcijskim encimom, da se ustvarijo združljivi lepljivi konci, ki jih bodo združili. Ko je tuja DNA vključena v vektorski genom, je znana kot rekombinantna ali rekombinantna molekula DNA.
Slika 02: Rekombinantna DNA
Kakšna je razlika med transformatorji in rekombinanti?
Diff Article Sredina pred mizo
Transformanti vs rekombinanti |
|
| Transformanti so celice, ki imajo v sebi molekulo rekombinantne DNA. | Rekombinanti so nosilne molekule, ki imajo tuje DNA vstavljene v lasten genom. |
| Izražanje tuje DNA | |
| So gostiteljske celice, ki lahko izrazijo rekombinantno DNA. | Morali bi biti sposobni samopodvajanja v gostiteljskem organizmu. |
| Izbira | |
| Celice, ki jih je mogoče enostavno gojiti in množiti, so izbrane kot gostiteljske celice. | Biti morajo zlahka izvlečni in vsebovati oznake, ki jih je mogoče izbrati. |
Povzetek - Transformanti vs rekombinanti
Transformanti so celice ali organizmi, v katerih so rekombinantne molekule DNA. Rekombinanti so organizmi ali celice, ki so bile podvržene genski rekombinaciji in imajo v svojih genomih tujo DNA. Bakterijske celice se pogosto uporabljajo kot gostiteljske celice za transformacijo, plazmidi in bakteriofagi pa se pogosto uporabljajo kot vektorji v tehnologiji rekombinantne DNA. To je razlika med transformanti in rekombinanti.
