Ključna razlika - HPLC proti HPTLC
Ključna razlika med HPLC in HPTLC je, da HPLC omogoča kvantitativno ločevanje komponent v vzorcu, medtem ko HPTLC ne omogoča kvantitativnega ločevanja komponent v vzorcu.
Kromatografija je metoda fizičnega ločevanja, ki se uporablja za ločevanje in prepoznavanje komponent v zmesi. Tako HPLC kot HPTLC sta kromatografski tehniki. HPLC je visoko zmogljiva tekočinska kromatografija. HPTLC je visokozmogljiva tankoslojna kromatografija.
VSEBINA
1. Pregled in ključna razlika
2. Kaj je HPLC
3. Kaj je HPTLC
4. Vzporedna primerjava - HPLC proti HPTLC v tabelarni obliki
5. Povzetek
Kaj je HPLC?
HPLC je tekočinska kromatografija z visoko zmogljivostjo. To je analitična tehnika, ki se uporablja za ločevanje, identifikacijo in količinsko opredelitev komponent v zmesi. Pri tej tehniki se vzorec raztopi v primernem topilu. Nato topilo z vzorcem prepustimo skozi črpalko z določenim tlakom. Črpalka je napolnjena s trdnim adsorbentom. Nato se nekatere komponente močno vežejo na vpojni material, medtem ko se druge komponente ohlapno vežejo. Zaradi tega imajo sestavni deli različne pretoke skozi črpalko. Zato je komponente mogoče enostavno ločiti.
Slika 01: Sistem HPLC
Adsorbent, ki napolni črpalko, je znan kot stacionarna faza. Topilo z raztopljenim vzorcem je znano kot mobilna faza. Črpalka, ki se uporablja v tej tehniki, se imenuje kolona. Kolona je napolnjena z adsorbentom, najpogosteje delci silicijevega dioksida. Velikost teh delcev je lahko med 2-50 μm. Na postopek ločevanja vplivata sestava mobilne faze in temperatura sistema. Interakcije med stacionarno fazo in komponento v vzorcu so lahko hidrofobne interakcije, dipol-dipolne interakcije, ionske vezi itd.
Delovni tlak HPLC je znatno višji od tlaka pri tradicionalni tekočinski kromatografiji. Leži okoli 50-350 barov. Razlika med tekočinsko kromatografijo in HPLC je v tem, da pri tekoči kromatografiji vzorec pade skozi kolono pod gravitacijo, medtem ko je pri HPLC vzorec pod pritiskom skozi kolono. Velikost kolone in vpojni delci so prav tako zelo majhni v primerjavi s tradicionalno tekočinsko kromatografijo. Vendar je ločljivost, ki jo daje tehnika HPLC, boljša.
Kaj je HPTLC?
HPTLC je visokozmogljiva tankoslojna kromatografija. Je napredna in avtomatizirana oblika tradicionalnega TLC. Ta tehnika zagotavlja učinkovito ločljivost v kratkem časovnem obdobju. Pri tej analitični metodi je mogoče istočasno analizirati vzorec in referenco, kar omogoča primerjavo vzorca z referenco. Omogoča izboljšano analitično natančnost kot druge kromatografske tehnike. Čas za analizo je krajši. Tehnika je poceni tehnika.
Slika 02: Analiza barvil za hrano z uporabo HPTLC
Metoda HPTLC je preprost postopek, odpravljen pa je tudi korak priprave vzorca (pri tradicionalnem TLC je korak priprave vzorca vključen pred ločevanjem. Ta korak vključuje čiščenje in obogatitev). Topilo lahko uporabimo neposredno brez predhodne obdelave, čeprav druge kromatografske tehnike zahtevajo predhodne obdelave, kot so odplinjevanje, filtriranje itd.
Adsorbent, ki se uporablja v HPTLC, je kremen z zelo majhnimi delci. V tradicionalni TLC je velikost delcev silicijevega dioksida 5-20 μm, medtem ko je v HPTLC 4-8 μm. Vzorec nanesemo na ploščo HPTLC z aplikatorjem. Omogoča enotno in varno uporabo. Nato se plošče postavijo v komoro z mobilno fazo. Komora mora biti nasičena s paro mobilne faze. Po postopku HPTLC je mogoče zaznati mesta, ki so se premaknila. Pri odkrivanju madežev na plošči HPTLC tehnika uporablja primerno UV območje ali jodno komoro.
Kakšna je razlika med HPLC in HPTLC?
Diff Article Sredina pred mizo
HPLC proti HPTLC |
|
| HPLC je visoko zmogljiva tekočinska kromatografija. | HPTLC je visokozmogljiva tankoslojna kromatografija. |
| Tehnika | |
| V HPLC se mobilna faza s topilom prenaša skozi kolono, napolnjeno s stacionarno fazo. | V HPTLC vzorec opazimo na plošči TLC in ga položimo v komoro, ki vsebuje mobilno fazo; nato se vzorec pusti seliti navzgor po plošči skupaj z mobilno fazo. |
| Merjenje | |
| V HPLC se razlike med pretoki komponent skozi kolono uporabljajo za ločevanje komponent v vzorcu. | V HPTLC se razlike med razdaljami, ki jih prevozi vsaka komponenta v vzorcu, uporabljajo za ločevanje komponent v vzorcu. |
| Količinsko ločevanje | |
| HPLC omogoča kvantitativno ločevanje komponent v vzorcu. | HPTLC ne dovoljuje kvantitativnega ločevanja komponent v vzorcu. |
Povzetek - HPLC vs HPTLC
HPLC in HPTLC sta dve kromatografski tehniki. Ključna razlika med HPLC in HPTLC je, da HPLC omogoča kvantitativno ločevanje komponent v vzorcu, medtem ko HPTLC ne omogoča kvantitativnega ločevanja komponent v vzorcu.
