Ključna razlika - CFU proti MPN
Enota za tvorjenje kolonij (CFU) in najverjetnejše število (MPN) sta dve metodi, ki se uporabljata za naštevanje mikroorganizmov v vzorcih. Oba parametra se uporabljata za odkrivanje kakovosti vode in indikatorskih bakterij v vzorcih vode. Enota za tvorjenje kolonij je mera, ki se uporablja za naštevanje števila sposobnih bakterijskih celic ali glivičnih celic v določeni prostornini ali teži določenega vzorca. Standardna enota za ta parameter je CFU / ml ali CFU / g. Najverjetnejše število je še ena enota, ki se uporablja za merjenje števila sposobnih bakterijskih celic v tekočem vzorcu. Ključna razlika med CFU in MPN je, da se CFU izračuna iz kolonij bakterij in gliv, ki rastejo na trdni agarni plošči, medtem ko se MPN izračuna iz uspešnih bakterij, ki rastejo v tekočem mediju.
VSEBINA
1. Pregled in ključna razlika
2. Kaj je CFU
3. Kaj je MPN
4. Vzporedna primerjava - CFU proti MPN v tabelarni obliki
5. Povzetek
Kaj je CFU?
Enota za tvorjenje kolonij (CFU) je parameter, ki meri število sposobnih bakterijskih ali glivičnih celic v danem vzorcu. Metoda, ki šteje enote, ki tvorijo kolonije, se imenuje standardno štetje plošč. Žive kolonije, ki se pojavijo na agarnih ploščah, so izražene kot CFU na 1 ml (enota, ki tvori kolonijo na mililiter) vzorca za tekočine ali CFU na 1 g (enota, ki tvori kolonijo na en gram) vzorca za trdne snovi.
Za merjenje CFU v vzorcu se uporabljata dve običajni metodi. Uporabljajo se z razpršeno ploščo in s prelivanjem. Ti dve metodi sta podprti s tehniko, imenovano serijsko redčenje. Serijsko razredčeni vzorci omogočajo preštevanje števila kolonij na površini agarja. Znan volumen vzorca lahko razporedimo na površino agarne plošče ali zmešamo z agarjem in nalijemo na ploščo. Nato ploščo inkubiramo in preštejemo nastale kolonije. Število kolonij se nanaša na število mikroorganizmov v prvotnem vzorcu. Plošče, ki kažejo preveč kolonij ali premalo kolonij, so izključene iz štetja, ker rezultati na teh ploščah morda niso statistično natančni. Statistično je najboljši razpon 30 - 300 kolonij na agarni plošči. Zato je treba za natančno naštevanje izbrati pravilne plošče. Za zgornjo funkcijo se izvede serijsko redčenje.
Ko preštejete število kolonij, ki so sposobne preživeti na ploščah, lahko CFU / ml izračunamo po naslednji enačbi.
CFU na ml prvotnega vzorca = število kolonij na faktorju redčenja X plošče
Faktor redčenja = (1 / razredčenje plošče)
Če na primer na plošči z razredčitvijo 10 -4 dobite 149 kolonij, lahko število bakterij v 1 ml prvotnega vzorca izračunamo na naslednji način:
CFU / ml = (149) x (1/10 -4)
= 149 × 10 4 ali 1490000
= 1,49 x 10 6
Slika 01: Enota za oblikovanje kolonije
Kaj je MPN?
Najverjetnejše število je alternativni ukrep za CFU / ml. MPN tudi oceni vitalne celice v tekočem vzorcu. Šteje organizme, ki rastejo v tekoči kulturi, in je pretežno bakteriološka tehnika. Ta metoda je še posebej uporabna za vzorce, ki vsebujejo nizke koncentracije bakterijskih celic; na primer mleko, pitna voda itd. Vrednost MPN je izražena za 100 ml prostornine. MPN se opira na statistično metodo, ki temelji na teoriji verjetnosti. Obstajajo statistične tabele, namenjene iskanju vrednosti MPN na 100 ml vzorca. Te tabele prikazujejo rezultate pri 95% mejah zaupanja.
Vrednost MPN se izračuna po izvedbi tehnike, imenovane metoda večkratne fermentacije. Tri sklope epruvet, ki vsebujejo primeren gojišče, inokuliramo s tremi različnimi volumni vzorca, kot so 10 ml, 1 ml in 0,1 ml, in inkubiramo za rast. Po inkubacijskem obdobju se epruvete ocenijo z + (pozitivno) ali - (negativno) za prisotnost ali odsotnost rasti. Nato vzorec pozitivnih in negativnih rezultatov primerjamo z MPN tabelo statističnih verjetnosti za oceno števila mikroorganizmov. Nato je navedena vrednost MPN za 100 ml vzorca. MPN se pogosto uporablja za odkrivanje koliformnih bakterij, prisotnih v vzorcih vode.
Slika 02: MPN tabela
Kakšna je razlika med CFU in MPN?
Diff Article Sredina pred mizo
CFU proti MPN |
|
| CFU je mera, ki se uporablja za izražanje števila kolonij bakterij ali gliv, ki so sposobne preživeti v danem vzorcu. | MPN je alternativni ukrep za CFU in meri število sposobnih bakterijskih celic v tekočem vzorcu. |
| Enota | |
| CFU / ml ali CFU / g | MPN / 100 ml |
| Izračun | |
| CFU se izračuna s štetjem števila kolonij, gojenih na agarnih ploščah. | MPN se izračuna s primerjavo pozitivnih in negativnih vzorcev cevi s statistično tabelo MPN. |
| Tehnika serijskega redčenja | |
| Serijsko redčenje izvedemo pred dajanjem vzorcev na plošče z agarjem. | Pri izračunavanju MPN se običajno ne izvaja serijsko redčenje |
| Metode | |
| Metoda razpršenega krožnika in izlivna plošča sta dve vrsti metod, s katerimi dobimo CFU. | Fermentacija z več cevmi je metoda, s katero se pridobi vrednost MPN. |
Povzetek - CFU proti MPN
Merjenje mikrobiološke rasti je potrebno iz več razlogov. V obratih za predelavo hrane je treba izmeriti raven in vrsto mikroorganizmov v hrani. V živilski industriji in medicini je treba zagotoviti učinkovito uporabo postopkov sterilizacije. V čistilnih napravah je treba rutinsko meriti število mikrobov. Pri optimizaciji postopka v molekularni biologiji je treba izmeriti število kolonij na ploščah. Na voljo so različne metode štetja in merjenja rasti. CFU in MPN sta dve takšni metodi, ki sta široko sprejeti na različnih področjih. CFU je merilo števila kolonij bakterij in gliv, ki so sposobne preživeti, prisotne v določenem vzorcu. Izračuna se s standardno metodo štetja plošč ali metodo preživetja plošč. MPN je še en ukrep, ki izraža število prisotnih bakterijskih celic v določeni prostornini tekočega vzorca. Izračuna se z uporabo metode fermentacije z več cevmi in tabelo MPN. To je razlika med CFU in MPN.
Prenesite PDF različico CFU vs MPN
Lahko prenesete različico tega članka v obliki PDF in jo uporabite za namene brez povezave v skladu z opombami k navedbam. Prenesite različico PDF tukaj Razlika med CFU in MPN.
