Ključna razlika - In situ hibridizacija proti imunohistokemiji
Diagnostika raka in nalezljivih bolezni je priljubljen trend, pri katerem se nove tehnike, ki temeljijo na proteomiki in genomiki, uporabljajo za identifikacijo tumorjev ali nalezljivih celic, njihovo širjenje in mesta celičnega razvoja ter analizo genetske osnove najbolj nalezljivih in nalezljivih bolezni. To bo privedlo do natančne obdelave in oblikovanja zdravil ter do razvoja prilagojenih terapij za bolezni. In situ hibridizacija (ISH) in imunohistokemija (IHC) sta dve tako pogosto uporabljeni tehniki v biologiji raka, ključna razlika med hibridizacijo in situ in imunokemijo pa je v molekulah, ki se uporabljajo v postopku analize. V ISH se v analizi uporabljajo sonde nukleinske kisline, medtem ko se v IHC za diagnostične določitve uporabljajo monoklonska in poliklonska protitelesa.
VSEBINA
1. Pregled in ključna razlika
2. Kaj je hibridizacija Situ
3. Kaj je imunohistokemija
4. Podobnosti med hibridizacijo In situ in imunohistokemijo
5. Vzporedna primerjava - In situ hibridizacija proti imunohistokemiji v tabelarni obliki
6. Povzetek
Kaj je In Situ hibridizacija (ISH)?
In situ hibridizacija je tehnika hibridizacije nukleinske kisline, ki se izvaja neposredno na delu ali odseku tkiva, v celotnem tkivu ali v celicah. Tehnika je odvisna od teorije komplementarnega parjenja baz Watson Crick, kar povzroči bodisi hibride DNA-DNA bodisi hibride DNA-RNA, ki lahko zaznajo mutirane gene ali identificirajo potrebni gen, ki nas zanima. Enoverižne sekvence DNA, dvoverižne sekvence DNA, enojne verige RNA ali sintetične oligonukleotidne sekvence se med tehniko hibridizacije uporabljajo kot sonde, te sonde pa so označene z radioaktivnim fosforjem na svojem 5 'koncu za identifikacijske postopke pri avtoradiografiji ali označene s fluorescenčnimi barvili. Na voljo so različne vrste ISH tehnik glede na vrsto uporabljene sonde in vrsto tehnike vizualizacije.
Slika 01: Fluorescentna hibridizacija in situ
Obstaja veliko aplikacij ISH, predvsem v molekularni diagnostiki nalezljivih bolezni, da bi ugotovili prisotnost patogenov in jih potrdili z molekularno diagnostiko. Uporablja se tudi na področjih razvojne biologije, kariotipizacije in filogenetske analize ter fizičnega kartiranja kromosomov.
Kaj je imunohistokemija (IHC)?
V tehniki IHC je glavna analizirana molekula antigen. Med IHC se monoklonska in poliklonska protitelesa uporabljajo za določanje prisotnosti antigenov ob okužbi ali stanju proliferacije malignih celic. Tehnika temelji na vezavi antigen-protitelo in za to tehniko se uporabljajo encimske oznake; ena takih aplikacij je ELISA (encimski imunski test). Označevalci so lahko tudi protitelesa s fluorescenčno oznako ali protitelesa, označena z radiem.
Slika 02: Imunohistokemija
IHC se pogosto uporablja za odkrivanje rakavih celic. Diagnostični postopki ciljajo na antigene, prisotne v tumorskih celicah, da bi identificirali in karakterizirali tumor. Isti postopek je vključen za diagnosticiranje povzročiteljev bolezni. Monoklonska in poliklonska protitelesa se uporabljajo tudi za analizo različnih genskih produktov, tako da omogočijo reakcijo vezave protitelo-antigen med želeno beljakovino in uporabljenim sintetičnim protitelesom.
Kakšne so podobnosti med hibridizacijo In situ in imunohistokemijo?
- ISH in IHC sta zelo specifični reakciji.
- Obe tehniki sta zelo natančni.
- Obe tehniki se lahko uporabljata pri diagnostiki raka in nalezljivih bolezni.
- Te tehnike se izvajajo v sterilnih okoljih in vitro.
- Obe hitri tehniki zagotavljata ponovljive rezultate.
- ISH in IHC uporabljata metode zaznavanja, kot sta radijsko označevanje in fluorescenčne tehnike.
Kakšna je razlika med hibridizacijo In situ in imunohistokemijo?
Diff Article Sredina pred mizo
In Situ Hibridizacija vs imunohistokemija |
|
| ISH je tehnika hibridizacije nukleinske kisline, ki se izvaja neposredno na delu ali odseku tkiva ali celotnem tkivu. | IHC je tehnika, pri kateri se za določanje prisotnosti antigenov, ki so posebni proteinski markerji na celičnih površinah, uporabljajo monoklonska in poliklonska protitelesa. |
| Analizirana vrsta bio molekul | |
| ISH analizira nukleinske kisline. | IHC analizira beljakovine-antigene. |
| Osnove biokemijske reakcije | |
| Pri tej tehniki pride do komplementarnega seznanjanja baz med DNA-DNA ali DNA-RNA. | Interakcije antigen-protitelesa sodelujejo pri imunohistokemiji. |
| Metode zaznavanja, vezane na encime | |
| Metod zaznavanja, vezanih na encime, v ISH ni mogoče uporabiti. | Metode zaznavanja, vezane na encime, se lahko uporabljajo v IHC. |
Povzetek - In situ hibridizacija vs imunohistokemija
Molekularna diagnostika je hitra in potrditvena metoda, ki jo je mogoče uporabiti za prepoznavanje nenalezljive bolezni, kot je rak ali nalezljiva bolezen, kot je HIV ali tuberkuloza, na podlagi molekularnih markerjev, prisotnih na celicah, ki vodijo do manifestacije bolezni. Molekularni markerji so lahko prisotni v obliki izraženih beljakovin ali na genetski ravni, na podlagi katere se uvedejo različne nove tehnike za povečanje učinkovitosti in so manj zahtevne, čeprav imajo te tehnike visoke stroške. Tako je ISH odvisen od tvorbe hibrida DNA-DNA ali DNA-RNA, IHC pa od specifičnih reakcij med protitelesom in antigenom. To je razlika med in situ hibridizacijo.
Prenesite PDF različico hibridizacije In Situ proti imunohistokemiji
Lahko prenesete različico tega članka v obliki PDF in jo uporabite za uporabo brez povezave, kot je navedeno v opombi. Prosimo, prenesite različico PDF tukaj Razlika med hibridizacijo in situ in imunohistokemijo.
