Ključna razlika - prehodna in stabilna okužba
Transfekcija je postopek, ki sodeluje pri prenosu genov evkariontskih celic s kemičnimi ali fizikalnimi metodami. Transfekcijo lahko razdelimo na dve glavni vrsti, imenovani prehodna in stabilna transfekcija. Med prehodno transfekcijo se gen, ki nas zanima, ne integrira z gostiteljskim genomom in se kratkočasno izrazi znotraj gostitelja, medtem ko se pri stabilni transfekciji gene, ki nas zanima, integrira z gostiteljskim genomom in se dolgo ohrani v več generacijah.. To je ključna razlika med prehodno in stabilno transfekcijo. V obeh primerih je transfekcija uspešna in geni so izraženi.
VSEBINA
1. Pregled in ključna razlika
2. Kaj je prehodna transfekcija
3. Kaj je stabilna transfekcija
4. Vzporedna primerjava - prehodna in stabilna transfekcija
5. Povzetek
Kaj je prehodna transfekcija?
Transfekcija je pomembno orodje za vstavljanje genov v evkariontske celice. Med dvema vrstama transfekcije je prehodna transfekcija pogost način prenosa genov. Skozi vektor se tuji geni transformirajo znotraj gostiteljskih celic. Ko tuja DNA vstopi v gostiteljsko celico, ima dve možnosti. Lahko se integrira z gostiteljskim genomom in razmnoži ali ostane v notranjosti, ne da bi se vključil v genom. Prehodna transfekcija kaže začasno izražanje vstavljenih genov, ne da bi se vključila v gostiteljski genom. Geni izražajo in proizvajajo kodirane beljakovine, dokler se celica ne razdeli. Vendar pa se zaradi nezmožnosti integracije ne more ponoviti in vstopiti v prihodnje generacije. Ta vrsta transfekcije je uspešna za kratek čas. Med delitvijo celic ali zaradi nekaterih drugih dejavnikov se tuja DNA razgradi. Prehodna transfekcija je prikazana, kadar je tuja DNA v obliki močno zvite DNA.
Slika 01: Prehodna transfekcija
Kaj je stabilna transfekcija?
Stabilna transfekcija kaže na uspešno vključitev tujih genov v genom gostitelja. Ko tuja DNA vstopi v gostiteljsko celico, se del tuje DNA integrira z gostiteljskim genomom in postane njegov del. Tako se tuja DNA tudi replicira in preide v prihodnje generacije, ko se gostiteljski genom razmnoži. Ta vrsta transfekcije je zapletena in redka. Zaradi stabilne transfekcije v genom pa se ta lastnost ohranja dlje časa več generacij.
Stabilna transfekcija je težek postopek in zahteva učinkovito dostavo DNK in pridobivanje celic tuje DNA v njenem genomu. Zato linearna DNA daje prednost stabilni transfekciji kot krožna DNA. Vendar je stabilna stopnja transfekcije približno ena od 10 4 transformiranih celic. Stabilno transfekcijo lahko opazimo s kotransfomacijo izbirnega markerja in umetno selekcijo na gojišču.
Slika 02: Stabilna transfekcija
Kakšna je razlika med prehodno in stabilno okužbo?
Diff Article Sredina pred mizo
Prehodna vs stabilna transfekcija |
|
| Tuja DNK se ne integrira v gostiteljski genom. | Tuja DNK se integrira z gostiteljskim genomom in postane njegov del. |
| Podvajanje znotraj gostitelja | |
| Prehodno transficirani geni se v gostitelju ne razmnožujejo. Zato se geni ne prenašajo na naslednje generacije. | Geni se razmnožujejo znotraj gostitelja in prenašajo v prihodnje generacije. |
| Čas trajanja izražanja genov | |
| Geni se izražajo za končno časovno obdobje, nato pa se uničijo. | Geni postanejo del genoma in se v generaciji izražajo dlje časa. |
| Uporaba | |
| To je koristno za preučevanje učinkov kratkotrajnega izražanja genov ali genskih produktov. | To je koristno za dolgoročno preučevanje učinkov genske ekspresije. |
| Odkrivanje transfekcije | |
| Geni so izraženi in jih je mogoče zlahka zaznati z vstavitvijo reporter gena. | Stabilno transfekcijo lahko enostavno zaznamo tako, da vstavimo izbirni marker in izberemo z umetno selekcijo na nosilcih. |
| Pojav in postopek | |
| Prehodna transfekcija je pogosta in ni zapletena za izvedbo. | Stabilna transfekcija je redka in zapletena za izvedbo. |
| Narava DNK | |
| Zelo super zvita DNA je primerna za prehodno transfekcijo. | Linearna DNA je primerna za stabilno transfekcijo. |
| Aplikacije | |
| Uporablja se za študije genskega knockdown-a ali utišanja z zaviralnimi RNA-ji, majhne proizvodnje beljakovin | Uporablja se za proizvodnjo beljakovin v obsežnih, dolgoročnih farmakoloških študijah, genski terapiji in raziskavah mehanizmov dolgoročne genske regulacije |
Povzetek - Prehodna vs stabilna transfekcija
Prehodne in stabilne transfekcije sta dve vrsti transfekcij, prikazani med prenosom gena v evkariontske celice z nevirusnimi sistemi. Preoblikovana tuja DNA pri prehodni transfekciji ni integrirana z genomom gostitelja, medtem ko se v stabilni transfekciji integrira z genomom gostitelja. V krožno naviti DNA je prikazana prehodna transfekcija, medtem ko linearna DNA raje stabilno. To je razlika med prehodno in stabilno transfekcijo. Vendar je prehodna transfekcija bolj pogosta in enostavna v primerjavi s stabilno transfekcijo. Toda izbira enega izmed dveh je odvisna od namena prenosa genov in trajanja raziskovalnega projekta.
