Ključna razlika - HPLC vs LCMS
Najprej si oglejmo pomen HPLC in LCMS, preden analiziramo razliko med HPLC in LCMS. Kromatografija je tehnika ločevanja pri kemijski analizi, pri kateri se vzorčne sestavine med prehodom skozi kromatografski medij ločijo. Vključuje tudi interakcijo z vzorcem, stacionarno fazo in mobilno fazo. HPLC je kratica za High Performance Liquid Chromatography in se uporablja kot metoda tekoče kromatografije v analitični kemiji. Kombinacija tekoče kromatografije in masne spektroskopije (LCMS) je bila razvita za kvantitativno analizo izbranih biomolekul in je zelo občutljiv, natančen in specifičen testni postopek v primerjavi s HPLC. To je ključna razlika med HPLC in LCMC. Ta članek vas bo seznanil s HPLC in LCMC, ki se ukvarjata s kemijsko analizo, in razpravljal o razlikah med HPLC in LCMS.
Kaj je HPLC?
Visoko zmogljiva tekočinska kromatografija (HPLC) je priljubljena tehnika ločevanja v analitični kemiji. Uporablja se predvsem za ločevanje komponent, prepoznavanje in kvantificiranje vsake komponente v zmesi. Prej je bila ta metoda znana kot visokotlačna tekočinska kromatografija, ker je bila odvisna od črpalk, da tekoče topilo pod pritiskom, ki vsebuje vzorčno zmes, pretaka skozi kolono, napolnjeno s trdnim adsorbentom. Vsaka sestavina v vzorčni mešanici različno medsebojno deluje s trdnim adsorbentom, kar ima za posledico različne pretoke za različne sestavine. To lahko vodi do ločevanja sestavnih delov, ko tečejo iz HPLC kolone.
HPLC se uporablja za različne aplikacije, kot so analiza ravni vitamina D v krvi, nezakonita uporaba drog športnikov z odkrivanjem ostankov zdravil v urinu, razvrščanje sestavin kompleksnega biološkega vzorca za raziskovalne namene ter za analizo in proizvodnjo farmacevtskih izdelkov.
Kaj je LCMS?
Tekoča kromatografija – masna spektrometrija (LCMS) je analitična tehnika, ki združuje fizične ločevalne sposobnosti tekočinske kromatografije z masnimi analiznimi sposobnostmi masne spektrometrije (MS). Tekoča kromatografija je ločevalna tehnika, masna spektrometrija pa se uporablja za analizo razmerja med maso in nabojem nabitih delcev. Fizično ločitev običajno dosežemo s HPLC, druga možnost pa je LCMS, znan tudi kot HPLC-MS. LCMS je prevladujoča analitična tehnika, ki ima zelo visoko natančnost, občutljivost in specifičnost v primerjavi s HPLC. Tako je uporaben v številnih aplikacijah, kot so raziskovalne namene, analiza zdravil, analiza hrane itd. LCMS se v glavnem uporablja za ločevanje, odkrivanje, prepoznavanje in kvantificiranje biokemijskih lastnosti določenega vzorca v prisotnosti zapletenih kemičnih zmesi.
Kakšna je razlika med HPLC in LCMC?
Kratica in opredelitev HPLC in LCMC
HPLC: HPLC pomeni visoko zmogljivo tekočinsko kromatografijo. To je tehnika ločevanja, ki se v glavnem uporablja za ločevanje komponent, prepoznavanje in kvantificiranje vsake komponente v mešanici.
LCMS: LCMS pomeni Liquid Chromatography in Mass Spectrometry. Gre za analitično tehniko, ki združuje fizične ločevalne sposobnosti tekočinske kromatografije s sposobnostmi masne analize masne spektrometrije (MS).
Značilnosti HPLC in LCMC
Razvrstitev
HPLC: To je samo metoda tekoče kromatografije.
LCMS: To je kombinacija metode tekoče kromatografije in metode masne spektrometrije.
Učinkovitost
HPLC: V primerjavi z LCMS je analiza HPLC manj učinkovita in počasnejša.
LCMS: V primerjavi s HPLC je analiza LCMS učinkovita in hitrejša.
Občutljivost
HPLC: V primerjavi z LCMS je analiza HPLC manj občutljiva.
LCMS: V primerjavi s HPLC je analiza LCMS bolj občutljiva.
Specifičnost
HPLC: V primerjavi z LCMS je analiza HPLC manj specifična.
LCMS: V primerjavi s HPLC je analiza LCMS bolj natančna.
Natančnost
HPLC: HPLC daje manj natančne rezultate kot LCMS za določanje nekaterih kemikalij.
LCMS: LCMS daje natančnejše rezultate kot HPLC za določanje nekaterih kemikalij.
Komponenta
HPLC: HPLC lahko obravnavamo kot sestavni del LCMS.
LCMS: LCMS ni mogoče šteti za sestavni del HPLC.
Ionski vir
HPLC: Ionski vir v instrumentu HPLC ne obstaja.
LCMS: Ionski vir je prisoten v instrumentu LCMS.
Aplikacije
HPLC: Ione, polimere, organske molekule in biomolekule lahko analiziramo s pomočjo HPLC.
LCMS: Analiziramo lahko organske molekule in biomolekule. V nasprotju s HPLC lahko LCMS uporabljamo za preučevanje nepopolno raztopljenih mešanic.
Delovanje
HPLC: Diagram instrumenta HPLC je podan na sliki 1 in običajno vključuje avto vzorčevalnik, črpalke in detektor. Vzorčevalnik mešanico vzorca vnese v mobilno fazo (zmes topil pod pritiskom, kot so voda, acetonitril in / ali metanol), ki jo prenese v kolono. Črpalke skozi steber zagotavljajo želeni pretok in sestavo mobilne faze. Kolona je napolnjena z adsorbentom, ki je zrnat trdni delček, na primer kremen ali polimeri. Detektor proizvaja signal, sorazmeren količini prisotnosti sestavine vzorca v koloni, kar omogoča merljivo analizo izbranih sestavin vzorca. Instrument HPLC nadzorujemo, analizo podatkov pa zagotavljata digitalni mikroprocesor in uporabniška programska oprema.
Slika 1: Diagram instrumenta HPLC
LCMS: Diagram instrumenta LCMS je podan na sliki 2. Izvleček vzorca se vstavi v stolpec, sestavljen iz HPLC. V tem stolpcu se zadržijo vzorci presnovkov, ki temeljijo na fizičnih lastnostih, različni presnovki pa se v različnih časovnih intervalih pretakajo v masni spektrometer. Masna spektroskopija se uporablja za ocenjevanje mas delcev, za določanje elementarne razporeditve molekule in za razjasnitev molekularnih struktur. Vendar je treba vzorec ionizirati, da ustvari nabite molekule, da se določijo njihova razmerja med maso in nabojem. Zato so LCMS namesto instrumentov HPLC sestavljeni iz dodatnih treh modulov, kot so vir železa, analizator mase in detektor. Vir ionov lahko pretvori vzorec plinske faze v ione in analizator mase, ki z uporabo elektromagnetnih polj združuje ione po njihovih masah. Končno,detektor kvantificira vrednosti in posreduje podatke o vsakem ionu, ki je prisoten v vzorcu. Tehniko LCMS lahko uporabimo tako za kvalitativne kot kvantitativne namene.
Slika 2: Diagram instrumenta LCMS
Na koncu je HPLC metoda tekoče kromatografije, medtem ko je LCMS kombinacija tekoče kromatografije in masne spektrometrije. Obe analitski tehniki imata različne značilnosti, vendar ju je mogoče uporabiti za identifikacijo in količinsko opredelitev sestavin živil, zdravil in drugih bioaktivnih molekul.
